Moleküler klonlama
Günümüzde Moleküler klonlama toplumda büyük önem kazanan bir konudur. Etkisi günlük yaşamın farklı alanlarında hissedildiği için farklı sektörlerde ilgi ve tartışma yaratan bir konudur. Moleküler klonlama'den farklı alanlardan insanlar görüşlerini ifade ettiler ve kapsadığı farklı nüansları iyice anlamaya çalıştılar. Bu makalede, Moleküler klonlama'i derinlemesine inceleyeceğiz, çeşitli yönlerini ve bugünkü etkisini analiz edeceğiz. Ayrıntılı ve titiz bir yaklaşımla, Moleküler klonlama ve onun çağdaş toplumdaki önemi hakkında kapsamlı bir bakış sunmayı amaçlıyoruz.
 | Bu madde hiçbir kaynak içermemektedir. (Temmuz 2024) (Bu şablonun nasıl ve ne zaman kaldırılması gerektiğini öğrenin) |
Moleküler klonlama, Gen çoğaltımı veya Gen klonlaması, rekombinant DNA moleküllerinin uygun bir konak hücreye sokularak orada çoğaltılması işlemine verilen addır.
Rekombinant DNA teknolojisi genelde, bir organizmadan elde edilen ve içinde istenilen geni taşıyan DNA parçalarının, taşıyıcı özellikte bir DNA molekülüne bağlanarak rekombinant DNA (cDNA) oluşturulması, rekombinant DNA moleküllerinin uygun bir konak hücreye sokularak orada çoğaltılmasını kapsayan bir süreci izlemektedir. Bu sürecin tanımlanmış bir DNA dizisinin yalıtımı (izolasyonu) ve daha sonrasında bunun birçok kopyasını in vivo koşullarda üretme aşamalarını kapsayan kısmı ise gen klonlamasıdır.
Klonlama, çoğunlukla gen içeren DNA parçalarının kuvvetlendirilmesi için kullanılsa da, DNA'nın promotorlar, kodlanmamış diziler, kimyasal sentezlenmiş oligonükleotidler gibi kısımlarını ve nadiren kırılmış DNA'yı kuvvetlendirmek için de kullanılabilir.
Bu süreçte konak hücreler çoğaldıkça rekombinant DNA molekülleri döllere geçerler ve yavru hücrelerde de kopya sayılarını arttırırlar. Çok sayıda hücre bölünmesini takiben oluşan bir klonda hücrelerin her birinde istenilen geni taşıyan cDNA moleküllerinin bir ya da daha fazla sayıda kopyası bulunur. Buna göre, gen klonlaması (ya da DNA klonlaması) tek bir genden kökenlenen ve hepsi birbirinin ayn olan bir DNA populasyonu elde etmektedir. Bu teknolojiyle ayrıca çoğu kez klonlanmış bir genin kendisi için yeni konakta ifade edimin (ekspresyonun) sağlanmasıyla ürünün eldesi de amaçlanmaktadır.
Moleküler klonlama, biyoloji deneylerinin ve yüksek oranda protein üretimi gibi teknolojik uygulamaların çoğunda yarar sağlamaktadır.
Geleneksel bir moleküler klonlama aşağıda belirtilen aşamalarda oluşmaktadır:[1]
- Konakçı organizmanın seçimi
- Klonlama vektörünün seçimi
- Vektörün hazırlanması
- İnsertin (eklenecek DNA parçasının) hazırlanması
- Rekombinant DNA'nın oluşturulması
- Rekombinant DNA'nın konakçı organizmaya aktarılması
- Vektörleri içeren organizma klonlarının seçimi
- İstenen rekombinant DNA moleküllerine sahip klonların taranması
- Rekombinant DNA'nın çoğaltılması ve izolasyonu
Ayrıca bakınız
- Rekombinant seçimi
- Gen yalıtımı (izolasyonu)
- Klonlama
- Polimeraz zincir tepkimesi
- Rekombinant DNA teknolojisi
- Genetik mühendisliği
Kaynakça
- ^ Bertero, Alessandro; Brown, Stephanie; Vallier, Ludovic (1 Ocak 2017), Jalali, Morteza; Saldanha, Francesca Y. L.; Jalali, Mehdi (Ed.), Chapter 2 - Methods of Cloning, Academic Press, ss. 19-39, doi:10.1016/b978-0-12-803077-6.00002-3, 27 Aralık 2024 tarihinde kaynağından arşivlendi, erişim tarihi: 26 Aralık 2024
